细胞培养需要哪些基本的实验条件

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1 、实验室设计

细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响
。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响 ，要求工作环境清洁
、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养工作包括：工作液配制、无菌操作(采样) 、温育、无菌处理
，细胞和用品贮存等 。细胞培养室的设计实施原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室 ，而洗刷消毒在另一室。

2
、常用设施及设备

(1)超净工作台：也称净化工作台
，分为侧流式、直流式和外流式三大类
。

(2)无菌操作间：一般由更衣间 、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱
、离心机、倒置显微镜等 。缓冲间可放置电冰箱 、冷藏器及消毒好的无菌物品等
。

(3)操作间：普通培养箱
、离心机、水浴锅 、定时钟
、普通天平及日常分析处理物品。

(4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅 、蒸馏水处理器及酸缸等 。

(5)分析间：显微镜
、计算机及打印机等
。

3、培养器皿

细胞培养以玻璃器皿为主，常准备最需使用量的三倍。器皿应选择透明度好 、无毒、中性硬度玻璃制品 。常用的玻璃器皿有下面几种
。

(1)液体储存瓶：用于储存各种配制好的培养液
、血清等液体 ，常以500ml、250ml 、100ml生理盐水瓶或血浆瓶代替。

(2)培养瓶：根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异
，用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀，便于细胞贴壁生长和观察 ，瓶口要大小一致
，口径一般不小于1cm，允许吸管伸入瓶内任何部位 ，规格有200ml
、100ml、50ml 、25ml
、10ml等几种 。用于外周血培养的常用10ml普通圆瓶
。两种培养瓶均要求选用优质玻璃制成。

(3)培养皿：用于开放式培养及其它用途 。分直径30mm、60mm 、120mm等几种。

(4)吸管：常用的有长吸管和短吸管两类
，长吸管也称刻度吸管
。其改良后管上部有球型刻度称改良吸管，刻度吸管用于移动液体。常用1ml和10ml 两种 。短吸管也叫滴管 ，分弯头和直头两种
。

(5)离心管：离心管是细胞培养中使用最广泛的器皿，根据用途不同形态各样
，常用于细胞培养的离心管有大腹式尖底离心管和普通尖底离心管两类。前者分别为50ml
、30ml、15ml;后者则多为10ml和5ml 。

(6)其它：如三角烧瓶 、烧杯
、量筒、漏斗 、注射器等
。

一、无菌室和超净工作台

是实验室的核心部分，主要为样品提供保护 ，保证实验结果的准确和人员的安全。

（一）无菌室

无菌室通过空气的净化和空间的消毒为微生物实验提供一个相对无菌的工作环境 。无菌室的主要组成设备的空气自净器
，传递窗，紫外线灯等
。严格的无菌室可能还装备风彬室等。

（二）超净工作台

超净工作台作为代替无菌室的一种设备 ，使用简单方便
，为实验的开展提供一个相对无菌的操作台 。超净工作台湾队根据风向分为水平式和垂直式
。

二
、培养箱

主要用于实验室微生物的培养，为微生物的生长提供一个适宜的环境。

（一）普通培养箱：一般控制的温度范围为：室温＋5～65度 ，又分为电热恒温培养箱和隔水式恒温培养箱 。

（二）生化培养箱：一般控制的温度范围为：5～50度。

（三）恒温恒湿箱：一般控制的温度范围为：5～50度
，控制的湿度范围为：50～90％
。可作为霉菌培养箱。

（四）厌氧培养箱：适用于厌氧微生物的培养 。

三、电热干燥箱：用于吸管，平皿类玻璃器皿的干热 、灭菌和烘烤
。

四
、高压蒸汽灭菌器（又叫高压灭菌锅）：物品的灭菌。

五、天平：一般要求具备精度达到万分之一的分析天平 。

六 、显微镜：观察细菌形态和动力
、微生物和微小物品结构的必备仪器
。

七、分光光度计：在QS中用于生产方便面 ，茶饮料
，肉制品，乳制品 ，棉白糖的企业。

八 、酸度计：在QS中用于生产果蔬罐头，白沙糖
，饮用水类的企业 。

九
、电导率仪和浊度仪:在QS中用于生产饮用水的企业
。

十、折光仪:在QS中用于生产果蔬罐头，饮料类的企业。

十一 、恒温水温浴锅:在QS中用于部分培养温度需要水浴（如大肠杆菌检验）生产方便面 ，速冻面米食品企业 。

十二
、定氮装置:在QS中用于生产乳制品
，含蛋白质饮料的企业
。

杂质度过滤机:在QS中用于生产乳品企业。

均质器：用于均质样品，有旋转刀片式和拍击式可以选择 。

常规玻璃器皿

一、 吸管：用于吸取少量液体 ，常用的吸管为0.1刻度1mL及1.0刻度的10mL吸管。

二 、培养皿：为硬质玻璃双碟
，常用于分离培养，盖与底大小应合适 ，常用规格为90mm
。

三、三角烧瓶与广口瓶：多用于盛培养基及配制溶液
，常用的规格有250mL
、500mL、1000mL。

四 、烧杯：供盛液或煮沸用，常用的规格为100mL
、250mL、500mL 、1000mL

五
、量筒：用于液体测量 ，常用规格为100mL、250mL 、1000mL

六
、试管：用于细菌培养
，有多种规格 。

七、载玻片盖玻片：细菌涂片观察用
。

八 、试剂瓶：装试剂用，常用棕色避光

九
、其它 ，如试管架、毛刷 、酒精灯、接种针
、接种环等

实验室配套常用设备

一、通风柜

二 、离心机

三
、纯水器

四、烘箱

五 、低温冰箱实验室常用消耗品(净化工作台)　

六
、其他

（一）实验室耗材（枪头）、振荡器 、菌落计数器
、电位 pH计、高速离心机 、离心管
、试管、巴氏吸管 、枪头盒、培养皿
、细胞培养板、酶标版 、过滤器
、移液管、接种环 、接种针
、比色皿、培养板 、PCR管
、量筒烧杯。

（二）常用设备，如铁架台、升降台 、滴定台
、镊子、搅拌子 、各种刷子、药勺
、滤纸、三脚架 、支架
，等等 。

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